解析！多肽分离色谱柱的分离原理及作用机理

　　多肽分离色谱柱适用于分析蛋白质多肽等生化样品。它柱效高，柱压低，经久耐用，代表性地反映了对产品生产过程的分步严格控制。且所选择的硅胶是经过严格质量监测的合格产品，粒度分布窄，颗粒表面均匀光滑，因而色谱柱柱效高，柱压却很低，并进一步延长了其使用寿命。

 

　　多肽分离色谱柱的分离原理：

　　采用反相流动相体系，而按照正相顺序出峰。通过亲水性相互作用，可有效的分离反相色谱柱中因保留能力弱而难分离的强极性化合物。是一种分离机理，而具备这种分离机理的键合相种类非常多。在HILIC中，固定相是极性的，流动相中的水相部分表现为强洗脱溶剂，这与传统的反相色谱法*相反。

 

　　作用机理：

　　可以被认为是反相液相色谱通过采用极性固定相来运行的。采用的流动相是含有少量水/缓冲盐或其他极性溶剂的高比例有机相。流动相中的水形成一个富水层被吸附在固定相表面，极性物质首先进入富水层得到保留。极性化合物是通过一个复杂的混合模式被保留的，包括：富水层和流动相之间的亲水分配、极性官能团和固定相间的氢键作用以及离子官能团的静电作用。当然，亲水分配是主要的保留模式。从保留机理来看，HILIC和反相色谱柱是有着非常大的差别的。

 

　　多肽分离色谱柱的优势及应用：

　　1、适合快速分离；

　　2、峰容量高；

　　3、用于分子量<20KDa的蛋白、多肽；

　　4、UHPLC和HPLC兼容；

　　5、耐用、性能可靠。